3.7 咖啡酸乙酯抑制Th1细胞及IFN-g产生相关通路
最新研究表明，Th1细胞因子IFN-g在RA患者和疾病模型病理机制中起着关键作用，为进一步揭示咖啡酸乙酯对IFN-g产生相关通路，我们应用荧光定量PCR检测IFN-g产生相关通路的基因表达水平。结果显示，咖啡酸乙酯显著抑制IFN-g，T-bet， STAT1和STAT4的基因表达水平。
讨论
类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)是常见的以慢性关节性病变为主要表现，以T细胞反应为主的自身免疫性疾病[11-12]。该病具有迁延日久、延绵难治的特点，是当今世界医学领域的难题。自身免疫性的T淋巴细胞激活和增殖参与到多种自身免疫性疾病的发病机制中，其中包括类风湿关节炎[13]。前期研究已表明，咖啡酸乙酯显著抑制丝裂原Con A和TCR诱导的T淋巴细胞增殖，且无明显的细胞毒性。提示咖啡酸乙酯具有治疗自身免疫性疾病的潜在价值，值得进一步研究。
胶原诱导的DBA/1小鼠关节关节炎(CIA)是用于研究人类类风湿性关节炎(RA)最经典、成熟的实验动物模型，在发病机理、疾病症状和病理特征上与RA都具有共同点，在国际上广泛应用于治疗类风湿关节炎药效评价和作用机理的研究[6]。实验结果表明，咖啡酸乙酯药物干预后显著降低胶原关节炎小鼠临床评分;在病理损伤程度方面，显著减少滑膜间质炎症细胞浸润，减缓关节破坏及骨破坏，显示出较好的治疗效果。
自身免疫性的T细胞激活和增殖参与到多种自身免疫性疾病的发病机制中，其中包括类风湿关节炎，未致敏的CD4 T细胞经抗原刺激活化后成为CD4+T 淋巴细胞，CD4+T 淋巴细胞在不同因素作用下，进一步向Th1、Th2、Th17、Treg等功能性细胞类型分化[14]。Th1细胞亚群极化依赖于细胞因子IFN-g与IL-12，T-bet、STAT4作为Th1细胞转录因子，调控T细胞向Th1方向分化。Th1类细胞主要分泌IFN-g、IL-2、IL-12，其主要功能是促进细胞免疫反应，激活巨噬细胞和中性粒细胞，促进炎症因子释放。临床研究亦表明，RA患者关节炎液Th1细胞因子优势表达。流式细胞胞内染色结果显示，咖啡酸乙酯药物干预显著下调Th1细胞因子(IFN-g)的表达，而Th17 (IL-17A) 和Treg细胞表达无显著变化，在Th1体外分化细胞模型中，咖啡酸乙酯干预显著抑制了Th1的分化，确证咖啡酸乙酯特异性抑制Th1细胞免疫反应。
最近这些年研究表明，细胞因子IFN-g在类风湿关节炎发病机制中扮演何种角色存在争议，既有RA疾病限制作用，又有促进疾病恶化功能，至今仍未给出满意解释。小鼠IFN-g基因敲除，通过IFN-g抑制IL-17的机制加重胶原关节炎小鼠发病程度[15]。大量研究显示，IFN-g在类风湿关节炎发病机制中扮演病理作用。在RA患者滑膜和关节炎腔中，IFN-g高表达。注射IFN-g抗体能显著降低CIA的发病率和疾病严重程度，与该结果一致，IFN-g或IFN-g受体基因敲除同样能降低胶原关节炎小鼠的发病率和严重程度[16]。这些结果表明，Th1细胞因子IFN-g在类风湿关节炎起着重要作用。大量研究已证实，两条信号通路参与Th1细胞因子IFN-g的产生，即(STAT1)/(T-bet)/IFN-g和IL-12/STAT4/ IFN-g信号通路 [17]。荧光定量PCR检测IFN-g产生相关通路的基因表达水平，结果显示，咖啡酸乙酯显著抑制IFN-g，T-bet，STAT1和STAT4的基因表达水平。基于此，我们推测咖啡酸乙酯可能通过干预IFN-g产生的关键信号通路，减少细胞因子IFN-g的产生及Th1免疫反应，从而介导对胶原关节炎的治疗作用。咖啡酸乙酯可能代表一种新的治疗类风湿关节炎的疗法，值得进一步研究。