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民族药地胆草有效成分咖啡酸乙酯抑制Th1细胞介导抗胶原关节炎作用机制的研究(4)

2017-09-27 17:51 来源:国医在线 发布人:高燕仙 浏览:

  3.4 咖啡酸乙酯口服给药显著减少中性粒细胞的表达和集聚

  流式表面染色结果表明,薯蓣皂苷口服给予20mg/kg药物干预并不影响CIA小鼠脾淋巴细胞CD4+T细胞、CD8+T细胞和B220+细胞的表达。然而,与CIA模型组比较,CD11b+Gr-1+中性粒细胞比例和绝对细胞数在咖啡酸乙酯给药组是下调的,经统计学分析,差异有显著性意义(P<0.05)。

  3.5咖啡酸乙酯口服给药特异性抑制胶原关节炎小鼠脾淋巴细胞Th1的表达

  流式细胞术检测脾淋巴细胞CD4+ T细胞亚群Th1(IFN-γ)、Th17(IL-17A)及Treg细胞的表达水平。结果显示,与CIA模型对照组比较,咖啡酸乙酯药物干预后, Th1(IFN-g)表达显著下调,差异有显著性意义(P<0.05),而Th17 (IL-17A) 和Treg细胞表达无显著变化(P>0.05),提示咖啡酸乙酯特异性抑制Th1细胞免疫反应。

  3.6咖啡酸乙酯抑制Th1细胞体外分化

  体内CIA关节炎模型小鼠上显示,咖啡酸乙酯干预特异性抑制Th1细胞免疫反应,为进一步揭示其对Th1细胞的作用。我们采用免疫磁珠分离法(阴性选择) 从小鼠脾淋巴细胞富集CD4+T细胞,纯化CD4+T细胞在Th1细胞极化条件下诱导分化生成Th1细胞。流式细胞检测结果显示,与体内实验结果一致,在Th1体外分化细胞模型中,咖啡酸乙酯干预显著抑制了Th1的分化。