3. 实验结果
3.1 蠲痹颗粒降低胶原关节炎小鼠发病的严重程度
表1结果显示,蠲痹颗粒口服给予1.89g/kg浸膏在再次免疫的的第8天、12天、14天、16天显著降低DBA/1小鼠胶原关节炎的临床评分,差异具有显著性意义。
表1 蠲痹颗粒对胶原关节炎小鼠临床评分的影响(mean±S.D,n=10)
组别 |
剂量 |
Days after booster immunization |
8天 10天 12天 14天 16天 18天 |
||
CIA模型组 |
- |
5.67±1.43 6.34±1.62 7.89±1.35 8.00±1.38 8.11±1.44 6. 89±1.71 |
MTX组 |
1mg/kg |
3.78±1.41* 5.11±1.48 5.33±1.61* 5.78±1.38* 6.11±1.66 5.89±1.50 |
蠲痹颗粒 |
1.89g/kg |
3.10±1.46 * 4.20±1.67 4.70±1.48** 5.40±1.64* 4.90±1.52** 4.70±1.65 |
注:与CIA模型组比较,* P﹤0.05,** P﹤0.01
3.2 蠲痹颗粒对CIA小鼠胶原(CII)特异性免疫应答的影响
表2结果表明,在CII刺激48h时间点,CIA模型组小鼠脾淋巴细胞表现出较强的增殖反应;而MTX组、蠲痹颗粒组小鼠脾淋巴细胞对CII诱导的增殖反应明显减弱,差异有显著性意义(P﹤0.01)。
表2 蠲痹颗粒对CIA小鼠淋巴细胞增殖功能的影响(mean±S.D,n=3)
组别 |
剂量 |
48h (CPM) |
CIA模型组 |
- |
2952.00±278.21 |
MTX组 |
1mg/kg |
1096.33±162.22** |
蠲痹颗粒组 |
1.89g/kg |
1242.66±74.00** |
注:与CIA模型组比较,* P﹤0.05,** P﹤0.01
3.4 蠲痹颗粒对CIA小鼠关节炎病理损伤的影响
图A. CIA模型组 10×10 图B. MTX组10×10 图C . 蠲痹颗粒组 10×10
图2 蠲痹颗粒对CIA小鼠关节炎病理损伤的影响(×100,HE)
CIA小鼠关节炎病理损伤随着疾病的推进而出现,到第20天时,我们对CIA小鼠的后足进行病理学分析,图A—图C结果显示,在CIA病理模型组小鼠中观察到典型的关节炎病理表现:大量的淋巴细胞浸润、滑膜组织增生、软骨和骨的侵蚀等(图A)。而阳性药MTX组和蠲痹颗粒组小鼠明显阻止关节炎滑膜炎和关节损伤(图B、图C)。
3.5 蠲痹颗粒对CIA小鼠Th1/ Th2/Th17 细胞因子表达谱的影响
静止T细胞在抗原刺激后激活、分化成为Th1、Th2、Th17等效应T细胞,它们分别释放不同的细胞因子,介导体内不同的免疫反应。表3、表4结果显示,蠲痹颗粒给药干预后,Th17 细胞因子(IL-17A)产生水平明显下调,差异有显著性意义(P﹤0.05);而Th1/ Th2型4种细胞因子(IFN-g, IL-4,IL-6,TNF-a)无明显变化(P﹥0.05)。
表3 蠲痹颗粒对CIA小鼠Th1/ Th2/Th17 细胞因子表达谱的影响(mean±S.D,n=3)
组别 |
剂量 |
IL-4(pg/ml) |
IFN-g(pg/ml) |
CIA模型组 |
- |
2.94±0.57 |
980.66±226.63 |
蠲痹颗粒组 |
1.89g/kg |
3.27±0.37 |
1087.93±144.45 |
注:与CIA模型组比较,* P﹤0.05
表4蠲痹颗粒对CIA小鼠Th1/ Th2/Th17 细胞因子表达谱的影响(mean±S.D,n=3)
组别 |
剂量 |
IL-6(pg/ml) |
TNF-a(pg/ml) |
IL-17A(pg/ml) |
CIA模型组 |
- |
31.72±3.52 |
339.02±12.30 |
659.89±33.52 |
蠲痹颗粒组 |
1.89g/kg |
33.96±1.32 |
329.97±12.25 |
556.75±21.46* |
注:与CIA模型组比较,* P﹤0.05