2.4克班宁脂质体处方研究
在单因素考察的基础上进行正交设计优化处方,固定胆固醇用量,考察药物:磷脂(A)、胆固醇:磷脂(B)、超声时间(C)三个因素对包封率的影响。每个因素取三个水平,选用L94 (3)正交表进行实验[6]。实验因素与水平见表2。
表2 正交实验因素水平表
工艺正交测定包封率结果见表3。
表3 工艺优化正交实验直观分析
表4 方差分析表
由方差分析可知,药物与磷脂之比对脂质体制备有显著性影响,综合表2和3,可以看出因素A(药脂比)的K3值最大,所以选择药脂比为1:35;因素B(胆固醇:卵磷脂)的K1值最大,所以选择1:12的比列;因素C(超声时间)的K3值最大,所以选择21min为最佳超声时间。
分析表明,因素A、B对实验结果有显著影响。最佳方案为 ,包封率可达81.87%。
2.5 验证试验
采用氯仿注入法按最佳方案 制备克班宁脂质体,分别精密吸取0.2mg/ml克班宁脂质体溶液3份上柱洗脱,收集含药脂质体的洗脱液,用无水乙醇破乳至50ml。用无水乙醇作为空白校正,在280nm处分别测定其吸光度见表5。
表5 验证试验结果
3 次验证试验的结果基本一致,说明所确定的优化工艺合理可行,稳定可靠,具有可操作性和重现性,本实验最佳工艺包封率可达80%以上。
2.6 克班宁脂质体稳定性初步考察
2.6.1透视电镜测定
用透射电子显微镜观察并拍摄克班宁脂质体的照片如图6所示。可见,部分脂质体呈现细长的棒状形态,或有聚集现象,多数为粒径均匀的球状或近球状的小囊泡。