β-PGG对高糖状态下INS-1细胞凋亡的保护作用

秦定梅1，范源1，罗敏2，赖琦1， 李玛琳1*(1云南中医学院 2 昆明医科大学)

（本论文荣获“第二届兰茂中医药发展学术论坛”优秀论文三等奖）

　　【摘要】 目的：探讨β-PGG对高糖状态下INS-1细胞凋亡的保护作用。方法：以大鼠胰岛瘤细胞株INS-1细胞为研究对象，采用改良MTT法测定细胞活性，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：用10-9～10-4mol/L的β-PGG分别处理对照组和高糖模型组细胞，对照组细胞存活率没有明显变化( P>0.05 )。当在高糖模型组中给予10-9、10-8mol/L β-PGG 48h后，和高糖模型组相比，细胞存活率没有明显变化（P>0.05）；给予10-4mol/Lβ-PGG后，细胞存活率与高糖模型组比较下降了14.7%(P<0.05)；给予10-7、10-6、10-5mol/Lβ-PGG剂量后，和高糖模型组相比，细胞存活率分别上升了14.5%、17.5%、28.9%（P<0.05)，细胞凋亡率分别下降了30.1%、35.0%、45.8%(P<0.01)。结论：β-PGG对正常INS-1细胞增殖无影响, 但在一定范围内具有促进高糖状态下INS-1细胞增殖的作用；β-PGG具有保护高糖状态下INS-1细胞凋亡的作用。

　　关键词：INS-1细胞 ；凋亡；β-PGG

　　Protective Effect of β-PGG on the Apoptosis of INS-1 cells Under High GlucoseAbstract

　　Objective: To investigate the protective effect of β-PGG on the apoptosis of INS-1 cells under high glucose .Methods: The rat insulinoma cell line INS-1 was used as test cell. The cell activity was determined by modified MTT method, and the apoptosis rate was detected by flow cytometer. Results: When cells both in control and model group treated with 10-9～10-4 mol/L of β-PGG, the cell survival rate in control group had no obvious change as compared with that in model group (P>0.05). After the cells in model group treated with 10-9 and 10-8 mol/L of β-PGG for 48h, the cell survival rate had no obvious change as compared with that in model group (P>0.05). When treated with 10-4mol/L of β-PGG, the cell survival rate was decreased by 14.7% (P<0.05). When treated with 10-7, 10-6 and 10-5 mol/L of β-PGG, the cell survival rate was increased by 14.5%, 17.5% and 28.9% respectively (P<0.05), while the apoptosis rate was increased by 30.1%, 35.0% and 45.8% respectively (P<0.01).Conclusions: β-PGG has no effect on the proliferation of normal INS-1 cells, but it has promoting effects on the proliferation of INS-1 cells in a centain range under high glucose.

　　Keywords: INS-1 cells; Apoptosis; β-PGG

　　2型糖尿病是一种严重危害人类健康的慢性病，其患病率在我国增长迅速。高糖状态下胰岛β细胞凋亡是2型糖尿病发生发展的重要病理基础之一[1] 。从控制β细胞凋亡入手治疗T2DM成为1个崭新的治疗靶点。五倍子是一种治疗糖尿病的传统中药，五没食子酰基葡萄糖（1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖，β-PGG）是一种天然的单宁多酚类化合物，其在五倍子中的含量最高。β-PGG具有抗炎、抗癌、抗血管生成、抗糖尿病及抗氧化等多种生物学活性[2]。然而，β-PGG能否对高糖状态下INS-1细胞凋亡具有保护作用尚不清楚。因此，我们借助胰岛β细胞株-INS-1以了解其对胰岛β细胞凋亡的保护作用。目前治疗2型糖尿病的药物种类很多，但尚无具有胰岛β细胞凋亡保护作用的药物，有的治疗糖尿病的药物还具有导致细胞凋亡的副作用。因此，寻找保护胰岛β细胞凋亡的治疗糖尿病的天然活性成分和新药有较高的价值和积极意义。

　　材料与方法

　　1、试剂与仪器

　　INS-1细胞株（来源于大鼠胰岛瘤），购自上海美轩科技有限公司。主要试剂：β-PGG（分子量980）为成都普瑞法科技开发有限公司提供,2～8℃密封保存，纯度﹥99%，批号为10421908；RPMI-1640(无糖)为美国Sigma公司提供,批号为SLBG1111；胎牛血清(FBS) 为GIBCO 公司提供，批号为1428478；细胞凋亡检测试剂为凯基生物提供，批号为 H8090。

　　流式细胞仪（美国BD公司，C6型）；CO2细胞培养箱（美国SHELLAB公司生产，2406型）；全波长酶标仪（美国MolecμLar Devices公司生产，Plus 384型）；