2.3 对照品溶液的制备
分别取黄芩苷对照品、甘草苷对照品和甘草酸铵对照品、盐酸小檗碱对照品各适量,照文献[8]相应品种【含量测定】项下的方法,依法制成对照品溶液,即得。
2.4供试品溶液的制备
2.4.1 饮片供试品溶液的制备分别取中药饮片黄芩片、甘草、黄连片,照文献[8]相应品种【含量测定】项下的方法,依法制成适宜浓度的供试品溶液,即得。
2.4.2 配方颗粒供试品溶液的制备取配方颗粒,研匀,精密称取适量,加水溶解并稀释制成适宜浓度的溶液,滤过,取续滤液,即得。
2.4.3 复方汤剂及复方汤剂阴性供试品溶液的制备取复方汤剂及阴性供试品,分别混匀,精密量取适量,分别加水稀释制成适宜浓度的溶液,滤过,取续滤液,即得。
2.5测定法
分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,测定,计算,即得。
2.6 测定结果
结果见下表1、表2和图1、图2、图3。
表1 不同厂家配方颗粒指标性成分HPLC含量测定结果表
表2传统复方汤剂和配方颗粒指标性成分转移率比较
从图1、图2、图3可以看出,除甘草中的甘草苷以外,各阴性样品对传统汤剂中相关饮片主要指标成分含量测定没有干扰,方法的专属性良好。
从表1结果可以看出,不同厂家的同一配方颗粒,除甘草酸基本一致以外,主要指标成分含量普遍差异相当大,达1.3 ~ 6.5倍,多在2 ~ 3倍之间,多数RSD在40%左右。
表2结果表明,同一饮片,在不同的传统复方汤剂中,其主要指标成分的转移率差异相对较小,在1.1 ~ 3.5倍之间,多在1.0 ~ 2.5倍之间,一半的RSD小于10%。表2的结果还表明,饮片主要指标成分在配方颗粒中的转移率,与传统汤剂比较,非生物碱成分基本一致,而生物碱成分则存在较大差异。
图1、图2、图3结果还表明,HPLC色谱图中各主要色谱峰在不同样品中的差异与含量测定用指标成分(峰S)差异基本一致。