冯莉萍 刘佳 汤泮泮 崔涛 王京昆 杨增明
(云南省药物研究所 云南白药集团创新研发中心 云南省中医药学会中药(民族药)专业委员会)
(本论文荣获“第四届兰茂论坛”优秀论文二等奖)
摘要：目的对中药饮片与其不同厂家配方颗粒、多种传统复方汤剂间指标成分的差异进行比较研究。方法选择3种中药饮片、2个厂家相应的配方颗粒及自制配方颗粒、4首相应的传统复方汤剂，研究建立各饮片主要指标成分的HPLC特征图谱及含量测定方法。结果同一种饮片的主要指标成分，在不同厂家配方颗粒中的含量差异在1.3 ~ 6.5倍，多在2 ~ 3倍之间，多数RSD在40%左右;在不同传统汤剂中的转移率差异在1.1 ~ 3.5倍之间，多在1.0 ~ 1.5倍之间，一半的RSD小于10%;配方颗粒中与传统汤剂比较，非生物碱成分的转移率基本一致，而生物碱成分则存在较大差异。结论饮片主要指标成分在不同传统汤剂中的差异普遍小于在不同厂家配方颗粒中的差异，也小于不同产地饮片间的差异;配方颗粒与传统汤剂中多数主要指标成分的转移率基本一致。
关键词：中药;配方颗粒;汤剂;比较研究
中药配方颗粒是由单味中药饮片经水提、浓缩、干燥、制粒而成，在中医临床配方后，供患者冲服使用[1]。中药配方颗粒保留了原饮片的药性、药效，具有易于调剂，携带、运输、储存、服用方便等优点[2]，同时还具有剂量准确、卫生[3]，以及生产规范、质量稳定、易于监管等优点。但是，传统复方汤剂在煎煮过程中，各饮片不同成分间的助溶和增溶作用，以及酸碱中和、水解、聚合、重排等化学反应可能普遍存在[4]。因此，与传统复方汤剂在有效性、安全性方面是否一致，与传统饮片的剂量关系如何等等，一直是中药配方颗粒争论、研究的核心问题，也是影响、制约配方颗粒应用、发展的主要障碍。
配方颗粒与对应的某一传统汤剂间有效成分差异的对比研究已有文献报道[5-7]，本研究就同一饮片在不同汤剂中，以及同一汤剂中不同饮片有效成分的含量及转移率进行研究，并与相应饮片配方颗粒进行比较，为中药配方颗粒研究与评价提供参考。
1、仪器与材料
DIONEX Ultimate 3000高效液相色谱仪(赛默飞世尔科技)。EYELA N-1000旋转蒸发仪，上海爱郎仪器有限公司。Mettler Toledo AG--285分析天平。ZPG-5离心喷雾干燥机(江苏宇通干燥工程有限公司)。HPLC用甲醇、乙腈均为色谱纯(德国Merck KGaA Group)，其他试剂为分析纯。对照品黄芩苷(1)(批号110715-201318)、甘草苷(2)(批号111610-201106)、甘草酸铵(3)(批号110731-201418)、盐酸小檗碱(4)(批号110713-200911)以及对照药材黄芩(批号120955-201309)、甘草(批号120904-200512)均购自中国食品药品检定研究院。
所有中药饮片均购自云南白药集团中药资源有限公司，均依据文献[8]鉴定并检验合格，其中，饮片甘草来源为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.，黄连来源为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.(习称“味连”)。2个厂家的市售中药配方颗粒经医师处方购自云南省中医医院，均为国家批准的科研试点企业产品。
2、方法与结果
2.1 供试品的制备
2.1.1 配方颗粒的制备[9-10]分别称取中药饮片黄芩片、甘草、黄连片各10 ~ 15 kg，分别加水适量，微沸煎煮提取二次，煎液滤过，滤液浓缩成清膏，喷雾干燥，加辅料适量，混匀，制成颗粒，分装，即得三种自制配方颗粒。
2.1.2 复方汤剂的选择与制备选择以下4种传统复方汤剂作为对比研究载体。
⑴泻心汤：大黄10g，黄连5g，黄芩5g。
⑵黄连汤：黄连9g，甘草9g(炙)，干姜9g，桂枝9g(去皮)，人参6g，半夏6g(洗)，大枣12枚(擘)。
⑶黄芩汤：黄芩10 g、芍药10 g、甘草10 g、大枣70 g。
⑷甘草黄芩汤：甘草2钱，黄芩2钱，茯苓3钱，半夏3钱，石膏3钱。
制备方法：照处方，按总饮片约100 g计算投料，取各饮片，加水煎煮二次，第一次加水约7倍量，浸泡30min，微沸煎煮30分钟，第二次加水约6倍量，微沸煎煮20分钟，100目滤布滤过，滤液60℃减压浓缩至每1ml含0.2g总饮片，即得。
2.1.3 复方汤剂阴性的制备照上述复方汤剂的制备方法，不加相应饮片，同法制备，即得。
2.2 色谱条件[8]
以Waters Sunfire C18(4.6×150 mm，5 μm)或Ecosil 120-5-C18 EPS(4.6×250 mm，5 μm)为色谱柱，进样量10 μl，体积流量1 ml/min，柱温30℃。
⑴黄芩：以甲醇-0.3%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱(0 → 60分钟，甲醇15% → 85%)。检测波长280 nm。
⑵甘草：以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相，梯度洗脱(0 → 8分钟，乙腈19%;8 → 35分钟，乙腈19%→ 50%)。检测波长223 nm。
⑶黄连：以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(50︰50)(每100 ml中加十二烷基硫酸钠0.4 g，再以磷酸调节pH值为4.0)为流动相，检测波长345 nm。