藏药三果汤对糖尿病大鼠GLP-1、GIP的影响

马定乾 白晓琳

（云南中医学院）

（本论文荣获“第五届兰茂论坛”优秀论文一等奖）

　　【摘要】目的：探究藏药三果汤对糖尿病大鼠胰高血糖素样肽-1（GLP-1）和糖依赖性胰岛素释放肽（GIP）等的影响。方法：将三果汤灌胃给大鼠6周，处死后取其外周血，进行相关激素试剂盒检测，计算分析数据。结果：藏药三果汤对糖尿病大鼠胃肠激素具有促进分泌的作用。结论：通过实验发现，藏药三果汤对糖尿病大鼠胃肠激素GLP-1和GIP激素有促进分泌作用，可为糖尿病及其并发症的治疗提供一定参考。

　　【关键词】三果汤；GLP-1；GIP

　　糖尿病是当今威胁人类健康的三大慢性非传染性疾病之一，预计在2025之前增加到3亿8000万人。胰岛素分泌不足和胰岛β细胞功能缺陷是导致此疾病的直接原因。糖尿病发病的分子机制目前仍不非常明确，但是公认的发病机制为氧化应激，内质网应急等[1]。

　　三果汤由余甘子，诃子和毛诃子组成，据《南方草本状考补》记载，该配方唐代以前广泛流传于印度、波斯等国家，有补益，清热和调和气血等功效。既是印度著名传统配方，又是许多常用藏药的基础方。现代学者对三果汤进行的研究表明，三果汤具有抗氧化、抗疲劳、防治高原红细胞增多症等作用[2]。现市面上已经存在三果片（商品名Triphala），有报道证明三果片具有抗肿瘤的作用[3-5]。

　　蛋白胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(glucose dependent insulinotropic polypeptide,GIP)，二者均可改善胰岛素敏感性，刺激胰岛素分泌，刺激胰岛β细胞增生及抑制胰岛β细胞凋亡等功能的激素。有研究表明肠道激素变化对糖尿病的形成起到关键作用[6]。

　　本实验首次使用藏药三果汤对糖尿病大鼠进行干预，探究其对胃肠激素GLP-1和GIP的影响。

　　1 材料与方法

　　1.1 实验动物与实验材料

　　Wistar雄性大鼠40只（实验动物许可证号：ZXK(川)2013-24）；酶标仪芬兰（Labsystems Multiskan MS）352型；血糖试纸及仪（Abbott雅培）；Elisa大鼠GLP-1试剂盒（上海酶联，批号：201610015），GIP试剂盒（上海酶联，批号：20161209）；链脲佐菌素（Streptozocin，STZ，Sigma，S0130）；余甘子，诃子和毛诃子购于安徽亳州市场；磷酸西格列汀片（捷诺维）。

　　1.2实验方法

　　1.2.1实验动物造模

　　40只大鼠随机分为正常组、模型组、三果汤组、西格列汀组共4组，除正常组外，其余各组大鼠空腹12h后一次性腹腔注射STZ 65mg/kg建立糖尿病模型，72h后测得空腹血糖≥16.7mmol/L即视为造模成功。

　　1.2.2 三果汤的制备及给药计量

　　取三果汤药材600g（余甘子：诃子：毛诃子=1：1：1）加2000mL水熬制3次，每次1h，过滤药渣，合并滤液，浓缩为0.5g/mL浸膏，备用。大鼠给药计量按照《藏药部颁标》规定的三果汤成人（按70kg计）每天6g的20倍灌胃即1.72g/(kg*d)，连续灌胃6周。

　　1.2.3样品取材及测定

　　将大鼠麻醉后腹主动脉取血，4℃，12000转/分条件下离心15min，吸取上清液备用。用Elisa试剂盒检测血清中GLP-1和GIP的含量。

　　2 实验结果

　　2.1造模成功率

　　实验动物造模后死亡5只，造模成功率83%，其中模型组死亡1只，西格列汀组死亡3只，三果汤组死亡1只。

　　2.2胃肠激素的检测结果

　　将各组结果用SPSS数据统计软件进行单因素方差分析，结果表明三果汤及西格列汀能增加糖尿病大鼠GLP-1和GIP分泌量。且与模型组相比有显著性差异（P<0.01）。见图1-2。

图1  各组糖尿病大鼠血清GLP-1的比较

图2  各组糖尿病大鼠血清GIP的比较